Kit ForeDirect RT-qPCR
Descrición do kit:
◮Para amplificación directa de ARN en tempo real a partir de coleccións de hisopos sen procesos de purificación de ARN.Este kit completa os ciclos qRT-PCR nunha hora.A mestura enzimática é unha mestura optimizada de transcriptase inversa, ADN polimerase Taq de inicio en quente e inhibidor da RNase.O tampón de reacción contén todos os compoñentes necesarios, incluídos os compoñentes do tampón optimizados, Mg2+, dUTP e dNTP.
Descrición
O kit ForeDirect RT-qPCR está deseñado para a amplificación directa de ARN en tempo real a partir de coleccións de hisopos sen procesos de purificación de ARN.Este kit completa os ciclos qRT-PCR nunha hora.A mestura enzimática é unha mestura optimizada de transcriptase inversa, ADN polimerase Taq de inicio en quente e inhibidor da RNase.O tampón de reacción contén todos os compoñentes necesarios, incluídos os compoñentes do tampón optimizados, Mg2+, dUTP e dNTP.
Especificacións
100T
Compoñentes do kit
| Axente de liberación de ácidos nucleicos |
| protector de ARN |
| 2 × RT-qPCR Buffer |
| Mestura enzimática (Taq e M-MLV) |
| Instrucións |
Aplicación PCR
1. Unha vez centrifugados brevemente os tubos de reacción de PCR, colócaos no tanque de mostras do instrumento de amplificación.
2. Protocolo térmico
| Paso | Temperatura | Tempo | Ciclos | |
| 1 | Transcrición inversa | 50℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Pre-desnaturalización | 95 ℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Desnaturalización | 95 ℃ | 10 segundos | 42 |
| 4 | Recocido/Extensión | 60℃ | 30 segundos | |
Nota:O sinal fluorescente detectouse inmediatamente despois do paso de extensión de cada ciclo.
3. Despois de configurar, garde o ficheiro e execute o programa de reacción.
Pasos Operativos
Antes da preparación dos reactivos, todos os reactivos do kit deben desconxelarse a temperatura ambiente e mesturarse suavemente.
Preparación de reactivos
1. Prepara a mestura de liberación de ácidos nucleicos
| Compoñente | Volume por mostra ou control |
| Axente de liberación de ácidos nucleicos | 5 μl |
| protector de ARN | 0,5 μl |
2. Prepara a mestura de reacción
| Compoñente | Volume por mostra ou control |
| 2 × RT-qPCR Buffer | 15 μl |
| Mestura enzimática (Taq e M-MLV) | 1,5 μl |
| Cebadores e sondas | 1 μl |
Almacenamento e vida útil
-O kit debe gardarse a -20± 5℃.O prazo de validez é de 12 meses.
-Evitar ciclos de conxelación-desconxelación repetidos (<5 ciclos).
