Kit RT-qPCR directo
Descrición do kit:
◮ O kit RT-qPCR directo, que utiliza a transcriptase inversa Foreasy e a polimerasa de ADN Taq Foreasy HS desenvolvida por Foregene, cun tampón de reacción único, fai que este kit teña unha forte resistencia e compatibilidade, e pode probar directamente a reacción usando o sistema Foregene Lysis como modelo.Este kit pode solicitar o kit de detección de ácidos nucleicos COVID-19 e o desenvolvemento de kits de detección de ácidos nucleicos doutras bacterias patóxenas.
Descrición
O kit RT-qPCR directo proporciona un tampón RT-qPCR empaquetado por separado e unha enzima de alta eficienciamestura (Taq、M-MLV、RI), o que o fai conveniente para a creación de kits e sistemas de fondoaxuste, dentro dunha simple verificación.
Especificacións
500T, 50.000T
Compoñentes do kit
| Contido do kit (Sistema de reacción 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Mestura enzimática directa | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
| 2 × Tampón RT-qPCR directo | 1 ml× 5 | 500 ml×1 |
| Instrución | 1 | 1 |
Pasos Operativos
Antes da preparación dos reactivos, todos os reactivos do kit deben desconxelarse a temperatura ambiente e mesturarse suavemente.
A: Prepárate of modelo e reactivo
1. Prepare un modelo de ARN preparado (recoméndase utilizar o kit da serie Foregene Total RNA Isolation Kit para extraer e purificar o modelo de ARN) ou un produto de craqueo de mostras (recoméndase utilizar o sistema Foregene Lysis), cebadores específicos (10 μM) e outros consumibles relevantes, instrumento.
2. Coloque o tampón RT-qPCR directo 2×, ddH2O libre de RNase e o colorante de referencia ROX 20× (se é's necesarios) na caixa con xeo, facendo que estes se derritan naturalmente e mestúranse suavemente.
B: Prepárate of RT-qPCR sistema
Táboa 1 : Prepárate of RT-qPCR ssistema
| Compoñente | Volume | Concentración final |
| 2 × Tampón RT-qPCR directo | 10 μl | 1× |
| Mestura enzimática directa | 1μl | |
| Cebador directo (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Cebador inverso (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μl | 200 nM |
| Modelo (ARN ou lisado) | X μL | |
| 20 × tintura de referencia ROX | - | 1* |
| H2O libre de RNase | (6,4-X) μl | |
| Volume total | 20μl |
C: Conxunto o RT-qPCR reacción programa
Táboa 2 : RT-qPCR reaccionaron programa configuración (para exemplo: dous-paso método)
| Paso | Temperatura | Tempo | Ciclos | Contido | |
| 1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Transcrición inversa |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Pre-desnaturalización | |
| 3 | 95 ℃ | 10 seg | 40-45 | Desnaturalización | |
| 60℃ | 30 segundos 2* | Recocido/Extensión | |||
Almacenamento e vida útil
-O kit debe gardarse a -20± 5℃.O prazo de validez é de 12 meses.
-Evitar ciclos de conxelación-desconxelación repetidos (<5 ciclos).
