Protocolo Kit PCR directo de tecido animal-UNG (sen ferramentas de mostraxe).
Descricións
Este kit usa un sistema único de tampón de lise para liberar rapidamente ADN xenómico de mostras de tecido animal para reaccións de PCR, polo que é especialmente axeitado para probas xenéticas a gran escala.
O proceso de liberación do ADN xenómico do tampón de lise complétase en 10-30 minutos a 65 °C.Non son necesarios outros procesos como a eliminación de proteínas e ARN, e o trazo de ADN liberado pode usarse como molde para a reacción de PCR.
2 × PCR fácilTMMix (UNG) usa dUTP en lugar de dTTP en base a 2×PCR EasyTMMestura e engade encima UNG (uracil-N-glicosilase) que pode degradar o molde que contén dUTP ao mesmo tempo.Antes da reacción de PCR, o encima UNG úsase para degradar o produto da PCR que contén uracilo.O encima UNG non terá ningún efecto sobre o molde que non conteña uracilo, garantindo así a especificidade e precisión da amplificación e evitando a posibilidade de contaminación dos produtos da PCR durante as probas xenéticas a gran escala.
A ADN polimerase D-Taq é unha ADN polimerase desenvolvida especialmente por Foregene para reaccións directas de PCR.A ADN polimerase D-Taq ten unha forte tolerancia a unha variedade de inhibidores da reacción de PCR, e pode amplificar de forma eficiente cantidades traza de ADN en varios sistemas de reacción complexos, e a velocidade de amplificación pode alcanzar os 2 Kb/min, o que é especialmente axeitado para a reacción de PCR directa.
Compoñentes do kit
Parte I | Tampón AL |
Protease de xenes anteriores | |
6× Tampón de carga de ADN | |
Parte II | 2 × PCR fácilTMMestura (UNG) |
Características e vantaxes
■Non hai unha purificación de ADN cara e lenta
■ A demanda de mostra é pequena, só se poden probar 5 mg de tecido animal.
■ Non é necesario ningún tratamento especial como moenda e trituración, e a operación é sinxela.
■ O sistema de PCR optimizado fai que a PCR teña unha maior especificidade e unha maior tolerancia aos inhibidores da reacción da PCR.
■ Sistema PCR anticontaminación 2×PCR fácilTMMix (UNG) elimina eficazmente a contaminación causada polos produtos de PCR e garante a especificidade e precisión da amplificación.
Parámetros do kit
Aplicación: unha variedade de tecidos animais.
ADN liberado da lise da mostra: só se usa como molde de PCR.
O kit pódese utilizar para os seguintes fins: identificación de transxenose, xenotipado animal, etc.
Fluxo de traballo
Almacenamento e vida útil
A parte I deste kit debe almacenarse entre 2 e 8℃.
O reactivo Buffer AL pódese almacenar durante 12 meses en condicións secas;pódese almacenar entre 2 e 8℃para un almacenamento máis longo.
O reactivo Foregene Protease ten unha fórmula única.Para garantir a súa actividade e estabilidade, gárdao no 4℃durante 12 meses.
Reactivo 6×O tampón de carga de ADN pódese almacenar en 4℃ou -20℃por moito tempo.
A parte II deste kit debe almacenarse a -20℃.
Reactivo 2×PCR fácilTMMix (UNG), se se usa con frecuencia, tamén se pode almacenar en 4℃para almacenamento a curto prazo (usar dentro de 10 días).