QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Descricións
O 2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman proporcionado polo QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit é un sistema de mestura principal de nova xeración deseñado para a reacción de amplificación de PCR en tempo real usando sondas fluorescentes específicas.O seu núcleo Foregene HS Taq DNA Polymerase baséase na modificación de anticorpos, usado xunto co sistema de PCR optimizado de Foregene, ten unha maior especificidade e eficiencia de amplificación.En comparación coa mestura de PCR común, ten unha maior capacidade de amplificación e menor taxa de desaxuste.Pódese usar na reacción de PCR cuantitativa de fluorescencia para reducir a amplificación inespecífica e mellorar a precisión da PCR.Pode mellorar moito a especificidade do produto e a sensibilidade á reacción.Ao mesmo tempo, proporcionouse ROX como tintura de referencia interna.
O QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit ten un amplo ámbito de aplicación para a cantidade de modelo, e pode obter unha boa curva estándar en diferentes rexións cuantitativas, e pode cuantificar e detectar con precisión xenes obxectivo con boa repetibilidade e alta confianza.
Especificacións
200 preparacións,500 preparacións,1000 preparacións,Preparacións 2000
Compoñentes do kit
QuickEasyTMKit de PCR en tempo real-Taqman(20μlsistema) | ||||
Contido do kit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 preparacións | 500 preparacións | 1000 preparacións | Preparacións 2000 | |
2×RápidoFácilTM PCR real Mesturar-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
20×Colorante de referencia ROX | 200μl | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
DdH libre de DNase2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
IFU | 1peza | 1peza | 1peza | 1peza |
Características e vantaxes
■ O exclusivo sistema de optimización de PCR fai 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman máis compatible.
■ Foregene HS Taq Polymerase de inicio en quente ten unha maior eficiencia de amplificación, maior sensibilidade de amplificación e maior especificidade de amplificación.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman utiliza un sistema único optimizado por Foregene para mellorar a sensibilidade e a especificidade da detección de sondas específicas de secuencia, que se pode usar para a determinación do xenotipado e a variación do número de copias e obter resultados precisos.
■ Este produto inclúe un tinte de referencia interno ROX, que se pode usar para eliminar o fondo de sinal e o erro de sinal entre os pozos, o que é conveniente para os clientes para usar en diferentes tipos de instrumentos de PCR cuantitativos.
Aplicación do kit
■ PCR cuantitativa de fluorescencia para análise cuantitativa de modelos;
■ Camplificación por PCR convencional;
■ Pódese utilizar para a detección de alelos.
Almacenamento e vida útil
O kit debe almacenarse a -20 ° C na escuridade;se se usa con frecuencia, tamén se pode almacenar a 4 °C durante un curto período de tempo (usar dentro de 10 días).
Principios de deseño de imprimacións de PCR en tempo real
Imprimación directa e imprimación inversa
Para a PCR en tempo real, o deseño do cebador é moi importante.Os cebadores están relacionados coa especificidade e a eficiencia da amplificación por PCR e pódense deseñar con referencia aos seguintes principios:
Lonxitude de imprimación: 18-30 bp.
Contido de GC: 40-60%.
Valor Tm: o software de deseño de imprimación, como Primer 5, pode dar o valor Tm da imprimación.Os valores de Tm dos cebadores augas arriba e augas abaixo deberían ser o máis próximos posible.Tamén se pode utilizar a fórmula de cálculo de Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Cando se realiza a PCR, xeralmente se selecciona unha temperatura por debaixo do valor Tm do cebador de 5 °C como temperatura de recocido (o aumento correspondente na temperatura de recocido pode aumentar a especificidade da reacción de PCR).
Cebadores e produtos de PCR:
A lonxitude do produto de amplificación da PCR do cebador de deseño é preferiblemente 100-150 pb.
Os imprimadores de deseño na zona estrutural secundaria da plantilla deben evitarse na medida do posible.
Evitar a formación de 2 ou máis bases complementarias entre os extremos 3′ dos cebadores augas arriba e augas abaixo.
A base terminal de cebador 3′ non pode estar presente con 3 G ou C consecutivos adicionais.
Os cebadores en si non poden ter estruturas complementarias, se non, formarase unha estrutura de horquilla, que afectará á amplificación da PCR.
O ATCG debe distribuírse o máis uniformemente posible na secuencia do cebador e debe evitarse a base terminal 3′ como T.
Apéndice 1: paquete complementario de compoñentes do kit Cell Direct RT-qPCR
1.Solución de lise celular
| |||
Compoñentes do kit (sistema de lise de 24 pozos/pozo) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Parteeu | Tampón CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampón ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ParteII | Borrador de ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mix
| |
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direct RT Mix | 800 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50 × tintura de referencia ROX | 40 μl | 200 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml | 10 ml |