Fábrica OEM de alta fidelidade Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix
Excelente Para comezar, e Consumer Supreme é a nosa directriz para ofrecer os mellores servizos aos nosos compradores. Nestes días, estamos intentando estar entre os principais exportadores da nosa industria para satisfacer os compradores que necesitan moito máis OEM Factory for High Fidelity Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix. Prometemos facer o noso mellor para ofrecerche produtos de alta calidade e económicos.
Excelente Para comezar, e Consumer Supreme é a nosa directriz para ofrecer os mellores servizos aos nosos compradores. Nestes días, estamos facendo todo o posible para estar entre os principais exportadores do noso sector para satisfacer os compradores que necesitan moito máisChina Taq DNA Polymerase e Qpcr, Co servizo superior e excepcional, estamos ben desenvolvidos xunto cos nosos clientes.A experiencia e o know-how aseguran que esteamos sempre gozando da confianza dos nosos clientes nas nosas actividades comerciais."Calidade", "honestidade" e "servizo" é o noso principio.A nosa lealdade e compromisos permanecen respectuosamente ao seu servizo.Póñase en contacto connosco hoxe Para obter máis información, póñase en contacto connosco agora.
Principios de deseño de imprimacións de PCR en tempo real
Imprimación directa e imprimación inversa
Para a PCR en tempo real, o deseño do cebador é moi importante.Os cebadores están relacionados coa especificidade e a eficiencia da amplificación por PCR e pódense deseñar con referencia aos seguintes principios:
- Lonxitude de imprimación: 18-30 bp.
- Contido de GC: 40-60%.
- Valor Tm: o software de deseño de imprimación, como Primer 5, pode dar o valor Tm da imprimación.Os valores de Tm dos cebadores augas arriba e augas abaixo deberían ser o máis próximos posible.Tamén se pode utilizar a fórmula de cálculo de Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Cando se realiza a PCR, xeralmente se selecciona unha temperatura por debaixo do valor Tm do cebador de 5 °C como temperatura de recocido (o aumento correspondente na temperatura de recocido pode aumentar a especificidade da reacción de PCR).
- Cebadores e produtos de PCR:
- A lonxitude do produto de amplificación da PCR do cebador de deseño é preferiblemente 100-150 pb.
- Os imprimadores de deseño na zona estrutural secundaria da plantilla deben evitarse na medida do posible.
- Evitar a formación de 2 ou máis bases complementarias entre os extremos 3′ dos cebadores augas arriba e augas abaixo.
- A base terminal de cebador 3′ non pode estar presente con 3 G ou C consecutivos adicionais.
- Os cebadores en si non poden ter estruturas complementarias, se non, formarase unha estrutura de horquilla, que afectará á amplificación da PCR.
- O ATCG debe distribuírse o máis uniformemente posible na secuencia do cebador e debe evitarse a base terminal 3′ como T.
Apéndice1: Cell DirectoRT-qPCR Compoñente do kitpaquete de suplementos t
1. Solución de lise celular
Solución de lise celular | |||
Compoñentes do kit (sistema de lise de 24 pozos/pozo) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Parteeu | Tampón CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampón ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ParteII | Borrador de ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direct RT Mix | 800 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml × 2 |
Mestura de qPCR | ||
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× directo qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × tintura de referencia ROX | 40 μl | 200 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml | 10 ml |
Excelente Para comezar, e Consumer Supreme é a nosa directriz para ofrecer os mellores servizos aos nosos compradores. Nestes días, estamos intentando estar entre os principais exportadores da nosa industria para satisfacer os compradores que necesitan moito máis OEM Factory for High Fidelity Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix. Prometemos facer o noso mellor para ofrecerche produtos de alta calidade e económicos.
Fábrica OEM paraChina Taq DNA Polymerase e Qpcr, Co servizo superior e excepcional, estamos ben desenvolvidos xunto cos nosos clientes.A experiencia e o know-how aseguran que esteamos sempre gozando da confianza dos nosos clientes nas nosas actividades comerciais."Calidade", "honestidade" e "servizo" é o noso principio.A nosa lealdade e compromisos permanecen respectuosamente ao seu servizo.Póñase en contacto connosco hoxe Para obter máis información, póñase en contacto connosco agora.
Principios de deseño de imprimacións de PCR en tempo real
Imprimación directa e imprimación inversa
Para a PCR en tempo real, o deseño do cebador é moi importante.Os cebadores están relacionados coa especificidade e a eficiencia da amplificación por PCR e pódense deseñar con referencia aos seguintes principios:
- Lonxitude de imprimación: 18-30 bp.
- Contido de GC: 40-60%.
- Valor Tm: o software de deseño de imprimación, como Primer 5, pode dar o valor Tm da imprimación.Os valores de Tm dos cebadores augas arriba e augas abaixo deberían ser o máis próximos posible.Tamén se pode utilizar a fórmula de cálculo de Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Cando se realiza a PCR, xeralmente se selecciona unha temperatura por debaixo do valor Tm do cebador de 5 °C como temperatura de recocido (o aumento correspondente na temperatura de recocido pode aumentar a especificidade da reacción de PCR).
- Cebadores e produtos de PCR:
- A lonxitude do produto de amplificación da PCR do cebador de deseño é preferiblemente 100-150 pb.
- Os imprimadores de deseño na zona estrutural secundaria da plantilla deben evitarse na medida do posible.
- Evitar a formación de 2 ou máis bases complementarias entre os extremos 3′ dos cebadores augas arriba e augas abaixo.
- A base terminal de cebador 3′ non pode estar presente con 3 G ou C consecutivos adicionais.
- Os cebadores en si non poden ter estruturas complementarias, se non, formarase unha estrutura de horquilla, que afectará á amplificación da PCR.
- O ATCG debe distribuírse o máis uniformemente posible na secuencia do cebador e debe evitarse a base terminal 3′ como T.
Apéndice1: Cell DirectoRT-qPCR Compoñente do kitpaquete de suplementos t
1. Solución de lise celular
Solución de lise celular | |||
Compoñentes do kit (sistema de lise de 24 pozos/pozo) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Parteeu | Tampón CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampón ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ParteII | Borrador de ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direct RT Mix | 800 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml × 2 |
Mestura de qPCR | ||
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× directo qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × tintura de referencia ROX | 40 μl | 200 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml | 10 ml |
Manuais de instrucións: