Abastecemento de fábrica China Rt-PCR rápido e cómodo Dspathtm 4X One-Step Multiplex Master Mix
Ten unha actitude positiva e progresiva para o interese do cliente, a nosa organización mellora constantemente a calidade dos nosos produtos para satisfacer as demandas dos compradores e céntrase aínda máis na seguridade, fiabilidade, especificacións ambientais e innovación de Factory Supply China Rt-PCR Rt-PCR Dspathtm 4X One-Step Master Mix pode ser un apoio de todo corazón.Sinceramente, dámoslle a benvida a que pase definitivamente polo noso sitio web e empresa e envíenos a súa consulta.
Ten unha actitude positiva e progresiva cara ao interese do cliente, a nosa organización mellora constantemente a calidade dos nosos produtos para satisfacer as demandas dos compradores e céntrase aínda máis na seguridade, fiabilidade, especificacións ambientais e innovación.ADN polimerase China Taq, Qpcr, Agora temos as mellores solucións e equipos de vendas e técnicos cualificados. Co desenvolvemento da nosa empresa, somos capaces de ofrecer aos clientes os mellores produtos, un bo soporte técnico, un servizo posvenda perfecto.
Descricións
Este kit usa un sistema de tampón de lise único que pode liberar rapidamente o ARN das mostras de células cultivadas para as reaccións RT-qPCR, eliminando así o laborioso e lento proceso de purificación de ARN.O modelo de ARN pódese obter en só 7 minutos.Os reactivos 5×Direct RT Mix e 2×Direct qPCR Mix-SYBR proporcionados polo kit poden obter resultados de PCR cuantitativos en tempo real de forma rápida e eficaz.
5×Direct RT Mix e 2×Direct qPCR Mix-SYBR teñen unha forte tolerancia aos inhibidores, e o lisado das mostras pódese usar como modelo para a RT-qPCR directamente.Este kit contén a única transcriptase inversa de ARN de alta afinidade Foregene e ADN polimerase Hot D-Taq, dNTPs, MgCl2, tampón de reacción, optimizador e estabilizador de PCR.
Especificacións
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Compoñentes do kit
Parte I | Tampón CL |
Foregene Protease Plus II | |
Tampón ST | |
Parte II | Borrador de ADN |
5 × Direct RT Mix | |
2 × Direct qPCR Mix-SYBR | |
50 × tintura de referencia ROX | |
DdH2O libre de RNase | |
Instrucións |
Características e vantaxes
■ Simple e eficaz: coa tecnoloxía Cell Direct RT, pódense obter mostras de ARN en só 7 minutos.
■ A demanda de mostra é pequena, só se poden probar 10 celas.
■ Alto rendemento: pode detectar rapidamente ARN en células cultivadas en placas de 384, 96, 24, 12 e 6 pocillos.
■ O borrador de ADN pode eliminar rapidamente os xenomas liberados, reducindo moito o impacto nos resultados experimentais posteriores.
■ O sistema optimizado de RT e qPCR fai que a transcrición inversa RT-PCR en dous pasos sexa máis eficiente e a PCR máis específica e máis resistente aos inhibidores da reacción RT-qPCR.
Aplicación do kit
Ámbito de aplicación: células cultivadas.
- ARN liberado pola lise da mostra: só aplicable ao modelo de RT-qPCR deste kit.
- O kit pódese utilizar para os seguintes fins: análise da expresión xénica, verificación do efecto silenciador de xenes mediado por ARNsi, cribado de fármacos, etc.
Diagrama
Almacenamento e vida útil
A parte I deste kit debe almacenarse a 4 ℃;A parte II debe almacenarse a -20 ℃.
Foregene Protease Plus II debe almacenarse a 4 ℃, non conxelar a -20 ℃.
O reactivo 2×Direct qPCR Mix-SYBR debe almacenarse a -20 ℃ na escuridade;se se usa con frecuencia, tamén se pode almacenar a 4 ℃ para almacenamento a curto prazo (úsalo nun prazo de 10 días). Con unha actitude positiva e progresiva cara ao interese do cliente, a nosa organización mellora constantemente a calidade dos nosos produtos para satisfacer as demandas dos compradores e céntrase aínda máis na seguridade, fiabilidade, especificacións ambientais e innovación de Factory Supply China Convenient and D Multiplext-PC Experience 4 Quick Master Mixt-PC a forza de traballo pode estar no seu apoio de todo corazón.Sinceramente, dámoslle a benvida a que pase definitivamente polo noso sitio web e empresa e envíenos a súa consulta.
Abastecemento da fábricaADN polimerase China Taq, Qpcr, Agora temos as mellores solucións e equipos de vendas e técnicos cualificados. Co desenvolvemento da nosa empresa, somos capaces de ofrecer aos clientes os mellores produtos, un bo soporte técnico, un servizo posvenda perfecto.
Principios de deseño de imprimacións de PCR en tempo real
Imprimación directa e imprimación inversa
Para a PCR en tempo real, o deseño do cebador é moi importante.Os cebadores están relacionados coa especificidade e a eficiencia da amplificación por PCR e pódense deseñar con referencia aos seguintes principios:
Lonxitude de imprimación: 18-30 bp.
Contido de GC: 40-60%.
Valor Tm: o software de deseño de imprimación, como Primer 5, pode dar o valor Tm da imprimación.Os valores de Tm dos cebadores augas arriba e augas abaixo deberían ser o máis próximos posible.Tamén se pode utilizar a fórmula de cálculo de Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Cando se realiza a PCR, xeralmente se selecciona unha temperatura por debaixo do valor Tm do cebador de 5 °C como temperatura de recocido (o aumento correspondente na temperatura de recocido pode aumentar a especificidade da reacción de PCR).
Cebadores e produtos de PCR:
A lonxitude do produto de amplificación da PCR do cebador de deseño é preferiblemente 100-150 pb.
Os imprimadores de deseño na zona estrutural secundaria da plantilla deben evitarse na medida do posible.
Evitar a formación de 2 ou máis bases complementarias entre os extremos 3′ dos cebadores augas arriba e augas abaixo.
A base terminal de cebador 3′ non pode estar presente con 3 G ou C consecutivos adicionais.
Os cebadores en si non poden ter estruturas complementarias, se non, formarase unha estrutura de horquilla, que afectará á amplificación da PCR.
O ATCG debe distribuírse o máis uniformemente posible na secuencia do cebador e debe evitarse a base terminal 3′ como T.
Apéndice 1: paquete complementario de compoñentes do kit Cell Direct RT-qPCR
1.Solución de lise celular
| |||
Compoñentes do kit (sistema de lise de 24 pozos/pozo) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Parteeu | Tampón CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampón ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ParteII | Borrador de ADN | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mix
| |
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Direct RT Mix | 800 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Compoñentes do kit (sistema de reacción 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50 × tintura de referencia ROX | 40 μl | 200 μl |
DdH libre de RNase2O | 1,7 ml | 10 ml |