Seguimos o principio de administración de "A calidade é excepcional, a asistencia é suprema, a reputación é o primeiro", e sinceramente crearemos e compartiremos o éxito con todos os clientes do kit China Magpure Ffpe Rna por xunto de China paraIllamento de ácidos nucleicos& Kit de purificación, prometemos facer o noso mellor para ofrecerche produtos e servizos eficaces e de alta calidade.
Seguimos o principio de administración de "A calidade é excepcional, a asistencia é suprema, a reputación é o primeiro", e sinceramente crearemos e compartiremos o éxito con todos os clientes paraPurificación de extracción de ADN/ADN de China, Illamento de ácidos nucleicos, Cun sistema operativo totalmente integrado, a nosa empresa gañou unha boa fama pola nosa mercadoría de alta calidade, prezos razoables e bos servizos.Mentres tanto, agora establecemos un rigoroso sistema de xestión da calidade realizado no material de entrada, procesamento e entrega.Cumprindo o principio de "primeiro crédito e supremacía do cliente", damos a benvida aos clientes nacionais e estranxeiros para que cooperen connosco e avancen xuntos para crear un futuro brillante.

Especificacións

50 Preps, 200 Preps O kit usa a columna de spin e a fórmula desenvolvidas por Foregene, que poden extraer eficientemente ARN total de alta pureza e alta calidade de varios tecidos vexetais con alto contido en polisacáridos ou polifenois.Proporciona a columna de limpeza de ADN que pode eliminar facilmente o ADN xenómico do sobrenadante e do lisado de tecidos.A columna só de ARN pode unirse eficazmente ao ARN.O kit pode procesar un gran número de mostras ao mesmo tempo.

Todo o sistema non contén RNase, polo que o ARN purificado non se degradará.O tampón PRW1 e o tampón PRW2 poden garantir que o ARN obtido non estea contaminado por proteínas, ADN, ións e compostos orgánicos.

Compoñentes do kit

Características e vantaxes

■ Funcionamento a temperatura ambiente (15-25 ℃) durante todo o proceso, sen baño de xeo e centrifugación a baixa temperatura.■ Kit completo sen RNase, non hai que preocuparse pola degradación do ARN.■ Particularmente indicado para a purificación de ARN a partir de mostras vexetais de polisacáridos e polifenois.■ A columna de limpeza do ADN únese especificamente ao ADN, polo que o kit pode eliminar a contaminación do ADN xenómico sen engadir DNase.■ Alto rendemento de ARN: a columna só de ARN e a fórmula única poden purificar o ARN de forma eficiente.■ Velocidade rápida: fácil de operar e pódese completar en 30 minutos.■ Seguridade: non se precisa ningún reactivo orgánico.■ Alta calidade: os fragmentos de ARN purificados son de gran pureza, están libres de proteínas e outras impurezas e poden satisfacer varias aplicacións experimentais posteriores.

Parámetros do produto

■ Aplicacións posteriores: síntese de ADNc da primeira cadea, RT-PCR, clonación molecular, Northern Blot, etc. ■ Mostra: tecidos vexetais frescos ou conxelados de polisacáridos e polifenois ■ Dosificación: 50 mg de tecido vexetal ■ Capacidade máxima de unión de ARN da columna de purificación: 80 μg ■ Volume de elución: 50 μl: 200 μl

Aplicación do kit

É axeitado para a extracción e purificación de ARN total de mostras de tecido vexetal fresco ou conxelado (especialmente tecido de follas de plantas frescas) con alto contido en polisacáridos e polifenois.

Fluxo de traballo

Diagrama

Plant Total RNA Isolation Kit Plus procesou 50 mg de follas frescas de polisacáridos e polifenois e probouse mediante electroforese o 5% de ARN purificado.1: Plátano 2: Ginkgo 3: Algodón 4: Granada

Almacenamento e vida útil

Este kit pódese almacenar durante 24 meses en condicións secas a temperatura ambiente (15-25 ℃);se precisa almacenarse durante máis tempo, pódese almacenar entre 2 e 8 ℃.O tampón PSL1 pódese colocar a 4 ℃ durante 1 mes despois de engadir β-mercaptoetanol (recoméndase engadilo ao mesmo tempo do experimento). Seguimos o principio de administración de "A calidade é excepcional, a asistencia é suprema, a reputación é o primeiro", e sinceramente crearemos e compartiremos o éxito con todos os clientes de China Magpure Rna Kit para Ffpe por xunto de China.Illamento de ácidos nucleicos& Kit de purificación, prometemos facer o noso mellor para ofrecerche produtos e servizos eficaces e de alta calidade.
China por xuntoPurificación de extracción de ADN/ADN de China, Illamento de ácidos nucleicos, cun sistema operativo totalmente integrado, a nosa empresa gañou unha boa fama pola nosa mercadoría de alta calidade, prezos razoables e bos servizos.Mentres tanto, agora establecemos un rigoroso sistema de xestión da calidade realizado no material de entrada, procesamento e entrega.Cumprindo o principio de "primeiro crédito e supremacía do cliente", damos a benvida aos clientes nacionais e estranxeiros para que cooperen connosco e avancen xuntos para crear un futuro brillante.

A columna tapada

Despois de taponar a columna, o rendemento de ARN redúcese ou mesmo imposible de purificar o ARN e a masa de ARN obtida é baixa.

Análise da causa común:

1. As pausas de mostra non son completas.

A rotura da mostra non provoca que se bloquee completamente a COLUMNA DE LIMPEZA DE ADN, mentres que afecta o rendemento e a calidade do ARN.Recomendamos unha operación de moenda rápida nun nitróxeno líquido suficiente cando rompeu as mostras, intente esmagar a parede celular da mostra, a membrana celular e outros tecidos.Para mostras vexetais de polisacáridos de poliol, recomendámosche que use Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

2. Ao aspirar o sobrenadante da mostra separada coa columna de limpeza de ADN, pódese inhalar o posible precipitado fragmentado de células.

Os sedimentos fragmentados celulares tomados provocarán a Columna SÓ ARN que se bloqueará cando se realice a operación de adsorción de ARN (consulte o paso 6).Recomendámosche coidadosamente ao aspirar este sobrenadante para evitar que os restos celulares sexan aspirados.

3. A cantidade inicial da mostra é demasiado.

O uso excesivo da mostra producirá unha fragmentación incompleta da mostra ou unha lise celular incompleta polo Buffer PSL1, o que provocará o bloqueo da columna de purificación durante a purificación.Kit de illamento de ARN total da planta Cada mostra operativa purificada é de 50 mg.Para mostras vexetais de polisacáridos de poliol, recomendámosche que probes Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

4. A temperatura da centrífuga é demasiado baixa.

Todo o proceso de illamento e purificación do ARN realízase a temperatura ambiente (20-25°C), excepto que o tecido da mostra está roto por nitróxeno líquido. A temperatura dalgunhas centrífugas crioxénicas é inferior a 20℃, que pode causar o bloqueo da columna de limpeza de ADN e/ou da columna só de ARN.Se isto ocorre, configure a temperatura da centrífuga a 20-25℃, easegúrese de que a mestura de lise e/ou o sobrenadante engadido con etanol se quentouse previamente a 37ºC.°C.

Non se extraeu ARN ou o rendemento de ARN é baixo

Adoitan haber moitos factores que afectan á eficiencia da recuperación, tales como: contido de ARN da mostra, método de operación, volume de elución, etc.

Análise das causas comúns a continuación:

1. Durante a operación realizouse un baño de xeo ou centrifugación a baixa temperatura (4 °C).

Suxestión: Operar a temperatura ambiente (15-25°C) en todo o proceso, non faga baño de xeo e centrifugación a baixa temperatura.

2.O ARN foi degradado debido á conservación inadecuada da mostra ou á conservación a longo prazo da mostra.

Recomendación: as mostras recén recollidas deben conxelarse rapidamente en nitróxeno líquido e, a continuación, almacenarse a -80 °C durante moito tempo, evitar a conxelación e desconxelación repetida das mostras;ou remolla inmediatamente as mostras en solución RNAlater de estabilizador de ARN (mostras animais).

3.A fragmentación e lise insuficientes da mostra conducen ao bloqueo da columna de purificación.

Suxestión: ao moer o tecido, asegúrate de que o tecido estea suficientemente moído e transfirao rapidamente ao tampón PSL1 previamente preparado (confirme que se engadiu a proporción correcta de β-ME, consulte o paso 1 do procedemento).

4.O eluyente engadiuse incorrectamente.

Suxestión: asegúrate de que ddH2O libre de RNase se gotea no medio da membrana da columna de purificación.

5.Non se engadiu o volume correcto de etanol absoluto ao tampón PSL2 ou ao tampón PRW2.

Suxestión: siga as instrucións, engade o volume correcto de etanol absoluto ao tampón PSL2 e ao tampón PRW2 e mestura ben antes de usar o kit.

6.A cantidade de mostra de tecido é inadecuada.

Suxestión: Use 50 mg de tecido por 500 μl de Buffer PSL1.Usar demasiado tecido reducirá a cantidade de ARN extraído e tamén se reducirá a pureza do ARN resultante.Recomendamos encarecidamente que a dosificación inicial da mostra non supere os 50 mg por operación de extracción de ARN.

7.Volume de elución inadecuado ou elución incompleta.

Suxestión: o volume de eluyente da columna de purificación é de 50-200 μl;se o efecto de elución non é satisfactorio, recoméndase prolongar o tempo a temperatura ambiente despois de engadir ddH2O sen RNase precalentado, como 5-10 min.

8.A columna de purificación ten residuos de etanol despois do lavado con BufferPRW2.

Suxestión: se o tubo baleiro se centrifuga durante 1 min e aínda queda etanol despois do lavado no tampón PRW2, pode aumentar o tempo de centrifugación do tubo baleiro a 2 min, ou colocar a columna de purificación a temperatura ambiente durante 5 min para eliminar completamente o etanol residual.

9.O kit utilizouse incorrectamente.

Suxestión: para mostras de plantas de polisacáridos polifenólicos, é posible que non se poidan obter mostras de ARN ideais utilizando kits comúns como o Kit de illamento de ARN total de plantas.Recomendamos que use Plant Total RNA IsolationKit Plus, que está especialmente deseñado para mostras de plantas de polisacáridos polifenólicos.Un kit especialmente desenvolvido para extraer ARN de mostras vexetais de polifenois e polisacáridos.

O valor OD260/OD280 é baixo

A elución de ARN con ddH2O e usado para lecturas do espectrofotómetro dá como resultado valores baixos de OD260/OD280.Recomendamos usar 10 mM de Tris-HCl, pH 7,5 (en lugar de ddH2O libre de RNase para eluir ARN) para obter valores de OD260/OD280 relativamente correctos, consulte "Ensaios de concentración e purificación de ARN" na páxina 19.

O ARN purificado é degradado

A calidade do ARN purificado está relacionada con factores como a conservación da mostra, a contaminación da RNase e a manipulación.

Análise de causas comúns:

1.As mostras de tecido non se almacenaron a tempo despois da recollida.

Recomendación: se as mostras de tecidos non se usan a tempo despois da recollida, gárdaas inmediatamente en nitróxeno líquido a baixa temperatura ou transfiéraas a -80 °C para o seu almacenamento a longo prazo despois da conxelación rápida en nitróxeno líquido, ou mergulla inmediatamente as mostras na solución RNAlater estabilizadora de ARN (mostras animais).Para a extracción de ARN, intente utilizar mostras de tecido recén recollidas.

2.Conxelación e desconxelación repetidas de mostras de tecido.

Suxestión: ao almacenar mostras de tecido, o mellor é cortalas en anacos pequenos para a súa conservación, e sacar unha parte delas ao usalas para evitar a degradación do ARN provocada pola conxelación e desconxelación repetidas das mostras.

3.A RNase introdúcese no quirófano ou non se usan luvas desbotables, máscaras, etc.

Suxestión: os experimentos de extracción de ARN realízanse mellor en operacións de ARN separadas, e a mesa de laboratorio debe ser limpada antes do experimento e deben usarse luvas e máscaras desbotables durante o experimento para evitar a degradación do ARN causada pola introdución de RNase na maior medida.

4.O reactivo está contaminado pola RNase durante o seu uso.

Suxestión: Substitúao por unha nova serie de kits de extracción de ARN total de plantas para experimentos relacionados.

5.Os tubos de centrífuga e as puntas das pipetas utilizados para a manipulación do ARN están contaminados con RNase.

Suxestión: asegúrese de que os tubos de centrífuga, puntas de pipetas, pipetas, etc. utilizados na extracción de ARN estean todos libres de RNase.