Sempre pensamos e practicamos correspondente ao cambio de circunstancias, e crecemos.Pretendemos conseguir unha mente e un corpo máis ricos, así como a vida para os comerciantes por xunto de kits preenvasados ​​de purificación de illamento de ácidos nucleicos magnéticos virales de ARN viral.Agardamos que poidamos ter unha colaboración agradable con empresarios de todo o medio ambiente.
Sempre pensamos e practicamos correspondente ao cambio de circunstancias, e crecemos.Pretendemos conseguir unha mente e un corpo máis ricos, así como a vida paraReactivos de ADN de Rna universal de China e purificación automática de ácidos nucleicos, Aspiramos a satisfacer as demandas dos nosos clientes a nivel mundial.A nosa gama de mercadorías e servizos amplíase continuamente para satisfacer as necesidades dos clientes.Congratulamo-nos con clientes novos e antigos de todos os ámbitos para contactar connosco para futuras relacións comerciais e lograr o éxito mutuo!
Manuais de instrucións:

 Sempre pensamos e practicamos correspondente ao cambio de circunstancias, e crecemos.Pretendemos conseguir unha mente e un corpo máis ricos, así como a vida para os comerciantes por xunto de kits preenvasados ​​de purificación de illamento de ácidos nucleicos magnéticos virales de ARN viral.Agardamos que poidamos ter unha colaboración agradable con empresarios de todo o medio ambiente.
Vendedores por xunto deReactivos de ADN de Rna universal de China e purificación automática de ácidos nucleicos, Aspiramos a satisfacer as demandas dos nosos clientes a nivel mundial.A nosa gama de mercadorías e servizos amplíase continuamente para satisfacer as necesidades dos clientes.Congratulamo-nos con clientes novos e antigos de todos os ámbitos para contactar connosco para futuras relacións comerciais e lograr o éxito mutuo!

Guía de análise de problemas

A seguinte análise dos problemas que podes atoparPlanta totalRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

A columna de rotación está obstruída

O bloqueo da columna de spin fará que o rendemento de ARN se reduza ou mesmo non poida ser purificado para obter ARN, e a calidade do ARN obtido será baixa.

Análise de causa común:

1. A mostra non está completamente rota.

A fragmentación incompleta da mostra pode bloquear a columna de limpeza do ADN, o que tamén pode afectar o rendemento e a calidade do ARN.Recomendamos que ao realizar a fragmentación da mostra, moa rapidamente en cantidades suficientes de nitróxeno líquido para romper os tecidos como as paredes celulares e as membranas celulares das mostras na medida do posible.Para mostras vexetais de polisacáridos polifenólicos, recomendámosche que utilices Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

2.Aspirar o sobrenadante illado da columna de limpeza de ADN, aspirar o posible sedimento de restos celulares.

O sedimento de restos celulares aspirados pode obstruír a columna só de ARN durante os procedementos de adsorción de ARN (consulte o paso 5 do procedemento, o paso 6 do procedemento de polifenol polisacárido).Recomendamos que se teña coidado ao aspirar este sobrenadante para evitar que se aspiren restos celulares.

3. A cantidade inicial de mostra é demasiado grande.

O uso excesivo da mostra producirá unha fragmentación incompleta da mostra ou unha lise incompleta das células por parte do Buffer PRL1 ou do Buffer PSL1, o que dará lugar a unha columna de purificación obstruída para as operacións de purificación.O kit de illamento de ARN total da planta ten un máximo inicial de 50 mg por purificación única dunha mostra operada.Para mostras vexetais de polisacáridos polifenólicos, recomendámosche que probes o Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

4. A temperatura da centrífuga é demasiado baixa.

Illamento e purificación de ARN completo, excepto pola interrupción do nitróxeno líquido do tecido da mostra, todos os pasos realízanse a temperatura ambiente (20-25 °C).Algunhas centrífugas de baixa temperatura teñen temperaturas inferiores a 20 °C, o que pode causar bloqueos na columna de limpeza do ADN e/ou na columna só de ARN.Se isto ocorre, configure a temperatura da centrífuga a 20-25 °C e prequente a mestura de lise e/ou a adición de sobrenadante de separación de etanol a 37 °C.

Non se extraeu ARN ou o rendemento de ARN é baixo

Adoitan haber moitos factores que afectan á eficiencia da recuperación, tales como: contido de ARN da mostra, método de operación, volume de elución, etc.

Análise das causas comúns a continuación:

1. Durante a operación realizouse un baño de xeo ou centrifugación a baixa temperatura (4 °C).

Suxestión: Operar a temperatura ambiente (15-25 °C) en todo o proceso, non facer baño de xeo e centrifugación a baixa temperatura.

       2.O ARN foi degradado debido á conservación inadecuada da mostra ou á conservación a longo prazo da mostra.

Recomendación: as mostras recén recollidas deben conxelarse rapidamente en nitróxeno líquido e, a continuación, almacenarse a -80 °C durante moito tempo, evitar a conxelación e desconxelación repetida das mostras;ou remolla inmediatamente as mostras en solución RNAlater de estabilizador de ARN (mostras animais).

       3.A fragmentación e lise insuficientes da mostra conducen ao bloqueo da columna de purificación.

Suxestión: ao moer o tecido, asegúrate de que o tecido estea suficientemente moído e transfirao rapidamente ao tampón PSL1 previamente preparado (confirme que se engadiu a proporción correcta de β-ME, consulte o paso 1 do procedemento).

4.O eluyente engadiuse incorrectamente.

Suxestión: asegúrese de que o ddH Libre de RNase₂O bótase no medio da membrana da columna de purificación.

5.Non se engadiu o volume correcto de etanol absoluto ao tampón PSL2 ou ao tampón PRW2.

Suxestión: siga as instrucións, engade o volume correcto de etanol absoluto ao tampón PSL2 e ao tampón PRW2 e mestura ben antes de usar o kit.

6.A cantidade de mostra de tecido é inadecuada.

Suxestión: Use 50 mg de tecido por 500 μl de Buffer PSL1.Usar demasiado tecido reducirá a cantidade de ARN extraído e tamén se reducirá a pureza do ARN resultante.Recomendamos encarecidamente que a dosificación inicial da mostra non supere os 50 mg por operación de extracción de ARN.

7. Volume de elución inadecuado ou elución incompleta.

Suxestión: o volume de eluyente da columna de purificación é de 50-200 μl;se o efecto de elución non é satisfactorio, recoméndase prolongar o tempo a temperatura ambiente despois de engadir ddH sen RNase precalentado.₂O, como 5-10 min.

8.A columna de purificación ten residuos de etanol despois do lavado con buffer PRW2.

   Suxestión: se o tubo baleiro se centrifuga durante 1 min e aínda queda etanol despois do lavado no tampón PRW2, pode aumentar o tempo de centrifugación do tubo baleiro a 2 min, ou colocar a columna de purificación a temperatura ambiente durante 5 min para eliminar completamente o etanol residual.

9.O kit utilizouse incorrectamente.

   Suxestión: para mostras de plantas de polisacáridos polifenólicos, é posible que non se poidan obter mostras de ARN ideais utilizando kits comúns como o Kit de illamento de ARN total de plantas.Recomendamos que use Plant Total RNA IsolationKit Plus, que está especialmente deseñado para mostras de plantas de polisacáridos polifenólicos.Un kit especialmente desenvolvido para extraer ARN de mostras vexetais de polifenois e polisacáridos.

O valor OD260/OD280 é baixo

Elución de ARN con ddH₂O e usado para lecturas do espectrofotómetro dá como resultado valores baixos de OD260/OD280.Recomendamos usar Tris-HCl 10 mM, pH 7,5 (en lugar de ddH libre de RNase₂O para eluir ARN) para obter valores de OD260/OD280 relativamente correctos, consulte "Ensaios de concentración e purificación de ARN" na páxina 19.

O ARN purificado é degradado

A calidade do ARN purificado está relacionada con factores como a conservación da mostra, a contaminación da RNase e a manipulación.

Análise de causas comúns:

1.As mostras de tecido non se almacenaron a tempo despois da recollida.

    Recomendación: se as mostras de tecidos non se usan a tempo despois da recollida, gárdaas inmediatamente en nitróxeno líquido a baixa temperatura ou transfiéraas a -80 °C para o seu almacenamento a longo prazo despois da conxelación rápida en nitróxeno líquido, ou mergulla inmediatamente as mostras na solución RNAlater estabilizadora de ARN (mostras animais).Para a extracción de ARN, intente utilizar mostras de tecido recén recollidas.

2.Conxelación e desconxelación repetidas de mostras de tecido.

   Suxestión: ao almacenar mostras de tecido, o mellor é cortalas en anacos pequenos para a súa conservación, e sacar unha parte delas ao usalas para evitar a degradación do ARN provocada pola conxelación e desconxelación repetidas das mostras.

3.A RNase introdúcese no quirófano ou non se usan luvas desbotables, máscaras, etc.

   Suxestión: os experimentos de extracción de ARN realízanse mellor en operacións de ARN separadas, e a mesa de laboratorio debe ser limpada antes do experimento e deben usarse luvas e máscaras desbotables durante o experimento para evitar a degradación do ARN causada pola introdución de RNase na maior medida.

4.O reactivo está contaminado pola RNase durante o seu uso.

   Suxestión: Substitúao por unha nova serie de kits de extracción de ARN total de plantas para experimentos relacionados.

5.Os tubos de centrífuga e as puntas das pipetas utilizados para a manipulación do ARN están contaminados con RNase.

Suxestión: asegúrese de que os tubos de centrífuga, puntas de pipetas, pipetas, etc. utilizados na extracción de ARN estean todos libres de RNase.

Manuais de instrucións:

Manual de instrucións do kit de illamento de ARN total da planta