Kit de illamento de ARN do sangue
Descrición do kit:
Cat.No.RE-04011/04013
Para a purificación total do ARN do sangue enteiro 104 ≤ Glóbulos brancos ≤ 107
Illa e purifica rapidamente o ARN do sangue dos glóbulos brancos.
-Non hai que preocuparse pola degradación do ARN.Todo o kit está libre de RNase
-Simple: todas as operacións realízanse a temperatura ambiente
-Rápido: a operación pódese completar en 20 minutos
-Alto rendemento de ARN: a columna só de ARN e a fórmula única poden purificar o ARN de forma eficiente
-Seguro: non se usa ningún reactivo orgánico
-Gran capacidade de procesamento de mostras: pódense procesar mostras de ata 200μl cada vez.
-Alta calidade: o ARN purificado é moi puro, libre de proteínas e outras impurezas e pode satisfacer varias aplicacións experimentais posteriores.
Descricións
O kit adopta a columna de rotación e a fórmula desenvolvidas pola nosa empresa, que poden extraer de forma eficiente ARN total de alta pureza e alta calidade do sangue total anticoagulado.O kit proporciona lisado de glóbulos vermellos (Buffer RCL), que pode lisar de forma rápida e eficiente os glóbulos vermellos e reter os glóbulos brancos.A eficiente columna de limpeza do ADN pode separar facilmente o sobrenadante e os lisados celulares e adsorber e eliminar o ADN xenómico.A operación é sinxela e aforra tempo;A columna só de ARN pode unir o ARN de forma eficiente e, cunha fórmula única, pode procesar un gran número de mostras ao mesmo tempo.
Todo o sistema RNase-Free fai que o ARN extraído non sexa degradable;O sistema de lavado de buffer RW1 e Buffer RW2 fai que o ARN obtido estea libre de proteínas, ADN, ións e compostos orgánicos contaminados.
Contido do kit
| Kit de illamento de ARN total de sangue | ||
| Composición do kit | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 veces | 200 veces | |
| Buffer RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Tampón BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Tampón BRL2 | 18 ml | 66 ml |
| Buffer RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Buffer RW2 | 24 ml | 96 ml |
| DdH libre de RNase2 O | 10 ml | 40 ml |
| Columna só de ARN | 50 conxuntos | 200 conxuntos |
| Columna de limpeza do ADN | 50 conxuntos | 200 conxuntos |
| manual | 1 copia | 1 copia |
Características e vantaxes
-Non hai que preocuparse pola degradación do ARN.Todo o kit está libre de RNase.
-Simple: todas as operacións realízanse a temperatura ambiente.
-Rápido: a operación pódese completar en 20 minutos.
-Alto rendemento de ARN: a columna só de ARN e a fórmula única poden purificar o ARN de forma eficiente.
-Seguro: non se usa ningún reactivo orgánico.
-Gran capacidade de procesamento de mostras: pódense procesar mostras de ata 200μl cada vez.
-Alta calidade: o ARN purificado é moi puro, libre de proteínas e outras impurezas e pode satisfacer varias aplicacións experimentais posteriores.
Parámetros do kit
Aplicación do kit:
É axeitado para a extracción e purificación de ARN total do sangue total de mamíferos.
Fluxo de traballo
Condicións de almacenamento
O tampón RCL (10×) debe almacenarse a 2-8 ℃;outros compoñentes do kit pódense almacenar a temperatura ambiente (15-25 ℃) en condicións secas e pódense almacenar durante 12 meses.O tampón BRL1 pódese almacenar a 4 ℃ durante 1 mes despois de engadir β-mercaptoetanol (opcional).
Nota: se se almacena a baixa temperatura, a solución é propensa á precipitación.Asegúrese de colocar a solución no kit a temperatura ambiente durante un período de tempo antes do uso.Se é necesario, prequentao nun baño maría a 37 °C durante 10 minutos para disolver o precipitado e mestura ben antes de usar.
Guías para a análise de problemas
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Non se pode extraer ARN ou o rendemento de ácido nucleico é baixo
Normalmente hai moitos factores que afectan á eficiencia da recuperación, como: contido de ARN da mostra, método de operación, volume de elución, etc.
Análise de causas comúns:
1.Baño de xeo ou centrifugación a baixa temperatura (4 ° C) durante o funcionamento.
Suxestión: Funcionamento a temperatura ambiente (15-25 °C), nunca baño de xeo e centrífuga a baixa temperatura.
2. Almacenamento inadecuado da mostra ou almacenamento da mostra durante demasiado tempo.
Suxestión: almacenar as mostras a -80 ° C ou conxelar en nitróxeno líquido e evitar o uso repetido de conxelación e desconxelación;intente utilizar mostras recén recollidas para a extracción de ARN.
3.Lise da mostra insuficiente
Recomendación: asegúrese de que a mostra e a solución de traballo (acrilamida lineal) se mesturaron e incubaron 10 min a temperatura ambiente (15-25 °C)
4.O eluyente engadiuse incorrectamente
Recomendación: asegúrese de que se engade ddH2O sen RNase ao medio da membrana da columna de purificación
5.Volum inadecuado de etanol anhidro no tampón viRW2
Suxestión: siga as instrucións, engada o volume correcto de etanol anhidro ao Buffer viRW2 e mestúreos ben antes de usar o kit.
6.Uso incorrecto da mostra.
Suxestión: 200 µl de mostra por 500 µl de Buffer viRL.Un volume de mostra excesivo producirá unha redución da taxa de extracción de ARN.
7.Volume de elución incorrecto ou elución incompleta.
Suxestión: o volume de eluyente da columna de purificación é de 30-50μl;se o efecto de elución non é satisfactorio, recoméndase engadir RNase-Free ddH precalentado2O e prolongar o tempo poñendo a temperatura ambiente, como 5-10min
8.Columna de purificación ten residuos de etanol despois de enxágüe no tampón viRW2.
Suxestión: se aínda queda etanol despois de lavar no Buffer viRW2 e centrifugar en tubo baleiro durante 2 minutos, a columna de purificación pódese deixar a temperatura ambiente durante 5 minutos despois da centrifugación en tubo baleiro para eliminar completamente o etanol restante.
A degradación de moléculas de ARN purificadas
A calidade do ARN purificado está relacionada con factores como o almacenamento da mostra, a contaminación por RNase e o funcionamento.
Análise de causas comúns:
1.As mostras recollidas non se gardaron a tempo.
Suxestión: se a mostra non se usa a tempo despois da recollida, almacénaa a -80 ℃ ou nitróxeno líquido inmediatamente.Para a extracción de moléculas de ARN, intente utilizar mostras recén recollidas sempre que sexa posible.
2. As mostras recollidas conxeláronse e desconxeláronse repetidamente.
Suxestión: Evite a conxelación e desconxelación repetidas (non máis dunha vez) durante a recollida e almacenamento da mostra, se non, o rendemento de ácido nucleico diminuirá.
3.Introduciuse a RNase no quirófano ou non se usaron luvas, máscaras, etc.
Suxestión: o experimento de extracción de moléculas de ARN realízase mellor nunha sala de operacións de ARN separada e a mesa experimental límpase antes do experimento.Use luvas e máscaras desbotables durante o experimento para evitar a degradación do ARN causada pola introdución de RNase.
4.O reactivo está contaminado pola RNase durante o uso.
Suxestión: Substitúeo por un novo kit de illamento de ARN viral para experimentos relacionados.
5.A contaminación por RNase dos tubos de centrífuga, puntas de pipetas, etc. Suxestión: asegúrese de que os tubos de centrífuga, as puntas das pipetas e as pipetas estean libres de RNase.
As moléculas de ARN purificadas afectaron aos experimentos posteriores
As moléculas de ARN purificadas pola columna de purificación afectarán aos experimentos posteriores se hai demasiados ións de sal ou proteínas, como: transcrición inversa, Northern Blot, etc.
1.Quedan ións de sal restantes nas moléculas de ARN eluídas.
Recomendación: asegúrese de que se engade o volume correcto de etanol anhidro ao Buffer viRW2 e lave a columna de purificación dúas veces segundo a velocidade de centrifugación correcta das instrucións de operación; Se aínda quedan ións de sal, pode engadir o Buffer viRW2 á columna de purificación e deixalo a temperatura ambiente durante 5 minutos.A continuación, realice a centrifugación para eliminar a contaminación dos ións de sal na maior medida
2.Hai etanol restante nas moléculas de ARN eluídas
Suxestión: unha vez confirmado que as columnas de purificación foron aclaradas mediante Buffer viRW2, realice a centrifugación en tubo baleiro segundo a velocidade centrífuga das instrucións de funcionamento.Se aínda queda etanol, pódese deixar durante 5 minutos a temperatura ambiente despois dunha centrifugación en tubo baleiro para eliminar o etanol restante na maior medida.
Manuais de instrucións:
Manual de instrucións do kit de illamento de ARN viral
-
Kit de illamento de ADN FFPE Purificación de extracción de ADN...
-
Micro Kit de ADN Genómico Mini Kit de ADN Micro Genómico
-
Kit de illamento de ARN total celular illamento de ARN total...
-
Sistema de identificación de ADN Foregene 30 AC (caso)
-
Sonda de fusión dual de cor dual BCR ABL1
-
Sonda de dobre cor D7S522/CSP7
