O encima Taq de inicio en quente úsase amplamente.En comparación coa ADN polimerase ordinaria, o encima Taq de inicio en quente pode evitar eficazmente algunha amplificación inespecífica e a formación de dímeros de cebador, e pode mellorar de forma efectiva a taxa de éxito da amplificación do xene diana.Especialmente no campo das probas xenéticas, o encima Taq de inicio en quente identificouse como un estándar obrigatorio na industria e non se debe usar ADN polimerase ordinaria.Como se pode ver polo anterior, os encimas Taq de inicio en quente úsanse amplamente.Actualmente, hai moitas marcas de enzimas Taq de inicio en quente no mercado nacional, pero non hai moitas enzimas Taq de inicio en quente de alta calidade.Ante tantos produtos enzimáticos Taq de inicio en quente, como debemos escoller?

1. Seleccione o encima Taq de inicio en quente con alta eficiencia de amplificación

A eficiencia da amplificación da PCR está moi relacionada co rendemento do encima Taq.Despois de optimizar un bo sistema de reacción enzimática Taq, a eficiencia de amplificación é superior ao 95% e o intervalo de amplificación da cantidade inicial de molde é amplo.Pódese obter unha amplificación satisfactoria cando o contido do xene obxectivo é baixo, e non é fácil envelenar cando a cantidade de molde é alta e o período de amplificación exponencial é longo.Para a enzima Taq cun rendemento deficiente, aínda que o sistema de reacción se optimizou moitas veces, a eficiencia de amplificación aínda é inferior ao 90%, a forma "S" da curva de amplificación non é obvia, a pendente é pequena e a curva é plana.Cando a cantidade de modelo é baixa, non se pode amplificar, e cando a cantidade de modelo é alta, o efecto de amplificación non é ideal.Polo tanto, a selección de ADN polimerases con alta eficiencia de amplificación é crucial para o éxito da PCR e qPCR.

2. Seleccione o encima Taq de inicio en quente con forte poder enzimático

O poder enzimático do encima Taq está relacionado coa eficiencia de amplificación.Xeralmente, canto máis forte sexa o poder enzimático do encima Taq de inicio en quente, máis longo será o período de crecemento exponencial da amplificación por PCR, canto máis típica sexa a curva "en forma de S", maior será o valor do sinal de fluorescencia e máis axeitado para a detección por PCR múltiple.As ADN polimerases de marca cun poder enzimático débil xeralmente só poden soportar reaccións de 2-plex.Ao facer reaccións 3-plex, a curva de amplificación é baixa, o valor do sinal de fluorescencia é baixo e non hai unha curva de amplificación típica, polo que os resultados son difíciles de xulgar.

3. Seleccione un encima Taq de inicio en quente con alta sensibilidade

En xeral, a ADN polimerase ten unha alta eficiencia de amplificación e unha alta sensibilidade, pero tamén hai inconsistencias.Se a abundancia do xene obxectivo da mostra que se vai amplificar é baixa, recoméndase probar a sensibilidade de amplificación do encima Taq.O método de detección máis común é realizar unha dilución en gradiente de 10 ou 5 veces do fragmento de plásmido do xene diana, realizar a detección por PCR na dilución máis baixa e seleccionar o encima Taq de inicio en quente con maior sensibilidade de detección.

Pódese ver polo anterior que os investigadores deben escoller segundo os seus propios requisitos experimentais e condicións de financiamento.É mellor facer un experimento de amplificación de dilución en gradiente para detectar a eficiencia da amplificación e a sensibilidade do encima Taq de inicio en quente.

Un exemplo de Foregene's Taq ADN polimerase:

Foreasy HS Taq ADN polimerase

Descrición

Foreasy HS Taq DNA Polymerase é unha ADN polimerase expresada en bacterias de enxeñaría Escherichia coli mediante tecnoloxía de recombinación xenética.O encima combínase cun tampón de reacción único, o que fai que o produto sexa moi resistente e compatible, e pode usar directamente o lisado de mostra (sistema Foregene Lysis) como modelo para as reaccións de detección.

Aplicación

Detección de PCR cualitativa e PCR cuantitativa de modelos purificados e modelos non purificados.

Control de calidade

1.Non se detectou actividade nuclease esóxena

2.Método PCR para detectar ADN xenómico residual sen hóspede

3.Pode amplificar eficazmente xenes dunha soa copia no xenoma humano

4.Gárdao a temperatura ambiente durante unha semana, sen cambios evidentes na actividade

Detalles do produto: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/