O nacemento da PCR
PCR (reacción en cadea da polimerase)
Pasaron máis de 30 anos desde a invención da reacción en cadea da polimerase.Durante máis de 30 anos, despois de que numerosos académicos de todo o mundo continúen complementando e mellorando, a tecnoloxía PCR converteuse no método de investigación básica máis utilizado e máis importante en todo o campo das Ciencias da Vida.
A PCR TouchDown, a PCR en tempo real, a PCR múltiple, etc. desenvolvidas sobre a base da ampla aplicación da tecnoloxía PCR tradicional, así como a recentemente xurdida PCR dixital (PCR dixital), enriqueceron moito os métodos de investigación da maioría dos investigadores científicos e aceleraron moito o proceso de desenvolvemento das modernas Ciencias da Vida, especialmente a bioloxía molecular, fixo grandes contribucións ao estudo da vida e da natureza da humanidade.
Defectos da tecnoloxía PCR tradicional
Separación de ácidos nucleicos complexos eextracción:
★ Tecnoloxía PCR tradicional: necesaria
★ Tecnoloxía derivada da PCR: necesaria
★ Mostras de ADN e ARN: grandes diferenzas, requisitos de operación difíciles
★ Riscos corporais: os reactivos tóxicos danan o organismo
A tecnoloxía PCR tradicional e a tecnoloxía derivada teñen un requisito previo: separación e purificación de ácidos nucleicos
Calquera mostra biolóxica debe pasar por unha serie de complicados e tediosos procesamentos de mostras para obter mostras de ácido nucleico que cumpran os requisitos da tecnoloxía PCR.
A separación e extracción de ADN e ARN foi sempre unha tarefa básica que os investigadores científicos relevantes deben repetir todos os días.
Debido ás enormes diferenzas entre as mostras, os procesos de separación e extracción de ADN e ARN tamén son moi diferentes.Este traballo require un alto nivel de competencia técnica para os operarios.As técnicas tradicionais de separación e extracción requiren un contacto a longo prazo con algúns reactivos químicos altamente tóxicos.Causará danos irreversibles no corpo do operador, e mesmo causará danos directos durante o experimento.
Ao mesmo tempo, para aqueles que teñen un gran número de mostras para estudar, a separación e extracción de ácidos nucleicos é unha tarefa intensiva en man de obra.
Os kits de illamento e extracción de ácidos nucleicos no mercado xa están maduros e hai moitas marcas, pero son máis ou menos iguais.Tanto se se trata dun kit centrífugo de columna de membrana de xel de sílice como dun kit de método de perlas magnéticas, leva moito tempo e é caro.Ademais do custo do kit, tamén hai requisitos especiais para o equipamento de laboratorio.A estación de traballo automatizada utilizada no método de perlas magnéticas é un equipamento de gran valor moi típico a gran escala, o que supón un gran gasto para o laboratorio.
En resumo
Antes de realizar experimentos de PCR, o pretratamento das mostras é un dor de cabeza inevitable e sempre para os investigadores.Como resolver este problema e se se poden realizar experimentos de PCR sen a separación e extracción de ácidos nucleicos sempre foi o pensamento da maioría dos investigadores científicos e do persoal do laboratorio clínico.
Solución de Foregene
Despois de anos de minuciosa investigación sobre a tecnoloxía Direct PCR e os kits relacionados, Forgene superou con éxito moitos pescozos de botella e logrou con éxito a PCR directa para moitos tipos de mostras diferentes cunha forte resistencia e adaptabilidade, o que permitiu aos investigadores desfacerse da engorrosa e perigosa separación e extracción de ácidos nucleicos.Isto reducirá en gran medida a intensidade laboral de todos, acelerará o proceso de experimentación e aforrará custos de investigación e probas científicas.
Comprensión e coñecemento de Forgene sobre DirectPCR
En primeiro lugar, a tecnoloxía DirectPCR é unha tecnoloxía de PCR directa para varios tecidos de mostra biolóxica.Baixo esta condición técnica, non hai necesidade de separar e extraer ácidos nucleicos, e a mostra de tecido utilízase directamente como obxecto e engádense os cebadores do xene diana para a reacción de PCR.
En segundo lugar, a tecnoloxía DirectPCR non é só unha tecnoloxía tradicional de amplificación de moldes de ADN, senón que tamén inclúe a PCR de transcrición inversa do modelo de ARN.
En terceiro lugar, a tecnoloxía DirectPCR non só realiza directamente reaccións de PCR cualitativas rutineiras en mostras de tecido, senón que tamén inclúe reaccións qPCR en tempo real, o que require que o sistema de reacción teña unha forte capacidade para resistir a interferencia de fluorescencia de fondo e antagonizar os extintores de fluorescencia endóxenos.
En cuarto lugar, as mostras de tecidos dirixidas pola tecnoloxía DirectPCR só requiren a liberación de modelos de ácidos nucleicos e non eliminan proteínas, polisacáridos, ións salinos, etc. que interfiran coa reacción da PCR.Isto require que a polimerase de ácido nucleico e a mestura de PCR do sistema de reacción teñan unha excelente antireversibilidade e adaptabilidade, e poden garantir a actividade enzimática e a precisión da replicación en condicións complexas.
En quinto lugar, as mostras de tecido dirixidas pola tecnoloxía DirectPCR non foron sometidas a ningún tratamento de enriquecemento de ácidos nucleicos e a cantidade de molde é moi pequena, o que require unha sensibilidade extremadamente alta e unha eficiencia de amplificación do sistema de reacción.
Conclusión
A tecnoloxía DirectPCR é un dos desenvolvementos e innovacións tecnolóxicas máis importantes dos últimos 30 anos desde o nacemento da tecnoloxía PCR.Forgene ten e seguirá sendo un pioneiro e innovador desta tecnoloxía.
A perspectiva de aplicación da tecnoloxía DirectPCR é moi ampla.A mellora e promoción continuas desta tecnoloxía seguramente traerán cambios subversivos no traballo de investigación e inspección científica.Esta é unha revolución da tecnoloxía PCR.
Data de publicación: 21-02-2017
