Aínda estás usando Trizol para extraer ARN?
Vaia, non me deixes preocupar pola túa saúde!
Trizol está a piques de ser marxinado, non me digas que aínda estás na escuridade?
O compoñente principal do reactivo Trizol é o fenol, e tamén se engaden reactivos orgánicos como o cloroformo na operación experimental.A exposición a longo prazo prexudicará a túa saúde, especialmente o contacto directo coa pel pode causar queimaduras químicas graves e cicatrices permanentes.
En circunstancias normais, os socios do laboratorio só poden reducir os riscos armándose completamente (usando batas de laboratorio, luvas e máscaras).
E o meu consello para ti é: substitúe Trizol directamente para evitar danos da fonte.
1. O produto de primeira xeración da extracción de ARN
Saída en 1987 (reactivos Trizol)
vantaxe:
Extracción máis completa
Desvantaxes:
Requírense reactivos tóxicos como isotiocianato de guanidina-fenol-cloroformo;
Operación engorrosa;
É necesario usar DNase para eliminar a contaminación do ADN
2. O produto de segunda xeración da extracción de ARN
Saíu en 1994 (QIAGEN RNeasy e a maioría dos produtos domésticos)
vantaxe:
Adoptase o método centrífugo de columna, que é fácil de operar;
Desvantaxe:
É necesario centrifugar para eliminar os restos de tecidos
É necesario usar DNase para eliminar a contaminación do ADN
3.O produto de terceira xeración da extracción de ARN
Saída en 2005 (QIAGEN RNeasy Plus e Forexenoprodutos da serie de purificación de ARN)
vantaxe:
Use directamente a columna de eliminación de ADN para eliminar o ADN e os restos de tecidos ao mesmo tempo, aforrando tempo e esforzo;
Seguro e cómodo, sen necesidade de engadir columna de filtro e DNase para eliminar facilmente as impurezas e evitar a contaminación do ADN
Vexamos as diferenzas operativas entre o produto de primeira xeración (Trizol), o produto de segunda xeración (RNeasy) e o produto de terceira xeración (Foregene) da extracción de ARN:
O funcionamento da figura é claro: o produto de terceira xeración ten vantaxes evidentes
Só tres palabras para describir: fácil!Rápido!Seguridade
O gráfico PK dos resultados experimentaisparaprodutos de primeira, segunda xeración e terceira xeración da extracción de ARN:
A primeira xeración (1: Trizol)
A segunda xeración (2:QIAGEN RFacil)
A terceira xeración (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)
Que tipo de produto é bo, saberá por comparación
ARN extraído mediante o kit Foregene
Non só alta concentración senón tamén boa integridade
2. Gráfico de qPCR (gráfico de curva de amplificación)
A segunda xeración (azul celestesignificaQIAGEN RNeasy-, vermellosignificaQIAGEN RNeasy +)
A terceira xeración (azul significa Foregene, verde significa QIAGEN RNeasy plus)
(Nota: o gráfico QIAGEN RNeasy de qPCR de segunda xeración significa que o kit non engade DNase e non elimina a contaminación do ADN. Polo tanto, o CT é maior e o resultado non é preciso; QIAGEN RNeasy + significa que se engadiu DNase e eliminouse a contaminación do ADN e o resultado é preciso)
Tanto se se trata dun electroforetograma como dun gráfico de curva de amplificación por PCR cuantitativa, a calidade dos produtos Foregene non é inferior aos produtos importados estranxeiros.
Hora de publicación: 16-Xul-2021