Introdución:

As moléculas de ARN poden interactuar extensamente con outras moléculas biolóxicas, como proteínas, ADN e ARN, e así existen en células e organismos en forma de complexos macromoleculares.Entre eles, os complexos ARN-proteína son a existencia e función do ARN Unha das formas importantes de.O pull-down de ARN é un método clásico para cribar e identificar moléculas de ARN, especialmente as proteínas que interactúan de moléculas de ARNlnc, e é recoñecido pola maioría dos investigadores e revistas académicas autorizadas internacionais.Hoxe FORREGENE compartirá contigo o principio experimental e o proceso técnico do pull-down de ARN, quizais poidas usalo

1. O principio experimental da tecnoloxía pull down de ARN:

Transcrición e síntese in vitro de fragmentos de lncRNA ou lncRNA diana marcados con biotina (incluíndo fragmentos de ARN utilizados como controis positivos e negativos) e incubar con extractos celulares;Use esferas magnéticas ancoradas en avidina para recoller complexos de ARN-proteína ou ARN-ARN. Despois dun lavado exhaustivo, o complexo elúese.Se detecta a molécula diana de proteína que interactúa co ARNlc, realice a electroforese de proteínas no produto de ARN-pull down, detecte a proteína diana mediante tinción de prata e corte o xel para a espectrometría de masas;tamén realiza directamente a verificación de western blot no produto despregable;se se detecta Para as moléculas diana de ARN que interactúan co ARNlnc, os produtos de ARN-pull down son sometidos a extracción de ARN e realízase a detección específica de qRT-PCR.

2. Proceso do experimento tecnolóxico de ARN pull down:

3. Servizo técnico de RNA pull down de FOREGENE:

Cultivo celular

Preparación de extracto de proteína total/nuclear/plasmática celular

Experimento de pull down de ARN

Electroforese SDS-PAGE, tinción de prata

Espectrometría de masas e experimentos WB

Informe experimental

4. Caso experimental

A seguinte figura mostra os resultados da detección de electroforese SDS-PAGE de ARN de FJ Bio-Bio, na que a frecha vermella marca a banda de diferenza:

O grupo de investigación do profesor Song Xu da Universidade de Sichuan acumulou 15 anos de acumulación a longo prazo no campo da investigación do lncRNA.Foregene Bio e o grupo de investigación do profesor Song Xu colaboraron para lanzar a tecnoloxía de ARN pull down do lncRNA, que lle dará un resultado satisfactorio para o seu experimento.