• facebook
  • linkedin
  • youtube

Construción do sistema SOP

Establecer un SOP do experimento de PCR para estandarizar o comportamento do persoal do experimento.

Catro formas de previr a contaminación dos produtos de PCR1

Os experimentadores cumpren estritamente os procedementos operativos e minimizan a contaminación por PCR que poden ser causadas por factores humanos ou evitan a aparición de contaminación na operación.Ademais, o experimentador debe ter os coñecementos e habilidades profesionais correspondentes, incluíndo a competencia para manexar equipos relacionados, aclarar todo o proceso de traballo, dominar os métodos de tratamento da contaminación e os métodos de control de calidade do laboratorio, e ser capaz de interpretar correctamente os resultados das probas.

Building Standard PCR Laboratory

Catro formas de previr a contaminación dos produtos de PCR2

O laboratorio de PCR divídese en catro áreas en principio, a saber, área de preparación de reactivos, área de procesamento de mostras, área de amplificación e área de análise de produtos de amplificación.As dúas primeiras áreas son áreas de pre-amplificación, e as dúas últimas áreas son áreas de post-amplificación.A zona de pre-amplificación e a zona de post-amplificación deben estar estrictamente separadas.Os materiais experimentais, reactivos, papel de rexistro, bolígrafos, materiais de limpeza, etc. só poden fluír dende a zona de pre-amplificación á área de posterior a amplificación, é dicir, desde a área de preparación de reactivos, a área de procesamento da mostra, a área de amplificación e a área de análise do produto de amplificación, e non deben fluír na dirección inversa.O fluxo de aire no laboratorio tamén debe fluír desde a zona de pre-amplificación á área de post-amplificación, non na dirección inversa.

Reducir os pasos experimentais

Se o laboratorio só realiza a detección e identificación por PCR, recoméndase utilizar a PCR cuantitativa fluorescente en lugar da PCR convencional.

Catro formas de previr a contaminación dos produtos de PCR3

Os resultados da detección de PCR cuantitativa de fluorescencia pódense recoller e analizar mediante sinais fluorescentes, polo que non hai necesidade de abrir a tapa para a electroforese despois da reacción, o que evita a contaminación dos produtos da PCR causada pola fuga de produtos de reacción para formar aerosois.Se aumenta o número de aberturas de tapa durante a etapa de carga da electroforese en xel, é probable que se produza contaminación por aerosol.Recoméndase promover a aplicación da PCR cuantitativa e substituír gradualmente a PCR cualitativa.

Adoptar o sistema anticontaminación da UNG

O sistema de contaminación de produtos anti-PCR UNG úsase para a reacción de PCR.

O sistema usa dUTP en lugar de dTTP.Despois da reacción de PCR, todos os produtos de PCR (fragmentos de ADN) incorpóranse con dUTP;na seguinte rolda de reacción de PCR, o encima UNG engadido ao sistema incúbase a 37 °C durante 5 minutos antes da PCR, que pode ser específico Degradar todos os fragmentos de ADN que conteñan dUTP e, a continuación, realizar a reacción de PCR.Isto pode eliminar completamente a contaminación do aerosol causada polos produtos de PCR.O efecto móstrase na seguinte figura:

Catro formas de previr a contaminación dos produtos de PCR4Nota: para a serie PCR directa, pode escoller os produtos da serie do sistema de contaminación de produtos anti-PCR de FJ Biotech

Suxerir

Para os laboratorios que realizan probas de xenotipado a gran escala, recoméndase encarecidamente utilizar o sistema de contaminación de produtos anti-PCR UNG para probar reactivos ademais da construción de laboratorios razoables.

Recordatorio: o uso deste sistema non pode eliminar a contaminación do produto PCR que xa foi causada.Polo tanto, o sistema UNG debe usarse ao comezo da proba correspondente e o sistema UNG debe usarse sempre para a amplificación da PCR, para evitar a contaminación dos produtos de PCR.Falso positivo.

Recoméndase utilizar o sistema Direct PCR-UNG de Forge Biotech cando se realicen probas a gran escala, como: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;

Plant Seed Direct PCR Kit-UNG;

Kit de PCR directa de tecido animal-UNG;

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Esta serie de kits de Foregene non só pode realizar a detección por PCR de forma rápida e a gran escala, senón que tamén pode previr e controlar de forma eficaz a contaminación dos produtos da PCR.


Hora de publicación: 30-Xul-2021