Introdución:

O ARN, nome científico ácido ribonucleico, a súa abreviatura provén de RiboNucleic Acid, é un tipo de ácido nucleico formado ao conectar polo menos decenas de ribonucleótidos mediante enlaces fosfodiéster.

A premisa de explorar o ARN é extraer ARN total libre de contaminación, e o principio básico da extracción de ARN pódese resumir como segue:

1. Primeiro rompe as células

2. Despois elimina as impurezas macromoleculares (proteínas, lípidos, ADN, etc.)

3. Finalmente, o ARN precipitouse mentres se eliminan sales e disolventes orgánicos e se purifica aínda máis o ARN.

Pasado e presente do método de extracción

A primeira xeración do método de extracción de ARN é o método de precipitación TRIzol (os reactivos utilizados inclúen isotiocianato de guanidina, fenol, cloroformo, etc.) inventado por un avó chamado Piotr Chomczynski e a avoa Nicoletta Sacchi, porque este invento permite a extracción do ARN de forma rápida e sinxela, desde entón comezou o aumento da investigación do ARN.

Máis tarde, o avó vendeu esta patente a Invitrogen, e Invitrogen promoveu este método no mundo e converteuse nun método moi utilizado.

Máis tarde, Invitrogen foi adquirida por Thermo!

Produto representativo: reactivo TRIzol de Invitrogen

Non obstante, o método de precipitación TRIzol require múltiples precipitacións e extraccións de ARN, e os reactivos utilizados son tóxicos e tardan moito en funcionar.

Polo tanto, xurdiu o método de purificación de encimas de columna de segunda xeración, utilizando membrana de xel de sílice como material específico de adsorción de ácidos nucleicos para maximizar a recuperación de ARN na mostra mentres se eliminan outras impurezas.

O método de segunda xeración simplifica a operación en base a un rendemento estable, reduce o factor de risco e mellora a eficiencia da extracción de ARN.

Produtos representativos: QIAGEN RNeasy e a maioría dos produtos domésticos

Non obstante, tanto os métodos de primeira como de segunda xeración requiren o uso de DNase para eliminar a contaminación do ADN, o que supón certo inconveniente para os experimentos posteriores.A DNase residual reducirá a eficiencia da transcrición inversa e reducirá a síntese de ADNc da primeira cadea, afectando así á precisión dos resultados.

Polo tanto, o método de extracción de terceira xeración optimízase a partir da segunda xeración.O experimento non precisa engadir encimas, e o ARN pódese obter facilmente con só dúas columnas.

Columna 1: Columna de limpeza do ADN para limpar o ADN

Columna 2: só ARN A columna adsorbe e recupera específicamente o ARN

Unha operación tan sinxela non só aforra tempo, senón que tamén facilita o funcionamento dos experimentos posteriores.

Produtos representativos: QIAGEN RNeasy Plus eForexeneprodutos da serie de purificación de ARN

（RNeasy Plus）

（ForegeneKit de illamento de ARN total da planta)

Dígocho tranquilamente!O kit de ARN de Foregene tamén presenta un borrador de RNase súper fácil de usar, que pode eliminar completamente 400 μg de RNase da superficie sólida en 1 minuto, sen engadir substancias tóxicas ao corpo humano.

Imaxe1: Cadro comparativo de procesos operativos

Os produtos de Foregene poden completar a extracción de ARN en só dúas cancións, non poña celos aos demais do progreso do seu experimento.

Imaxe2:Eresultados experimentais gráfico de comparación

A primeira xeración (1: TRIzol)

A segunda xeración (2: RNeasy de QIAGEN)

A terceira xeración (3: RNeasy plus de QIAGEN, 4: Foregene)

Imaxe3: gráfico qPCR (gráfico de curva de amplificación)

A primeira xeración (verde significa TRIzol -, vermello significa TRIzol +)

A segunda xeración (azul celeste significa QIAGEN RNeasy-, vermello significa QIAGEN RNeasy +)

A terceira xeración (azul significa QIAGEN RNeasy plus, verde significa Foregene)

(Nota: o gráfico de qPCR "-" indica que non se engadiu ADNase e non se eliminou a contaminación por ADN. Polo tanto, o CT é maior e o resultado non é preciso; "+" indica que se engadiu a ADNase e que se eliminou a contaminación por ADN, o resultado é preciso)

Cada actualización técnica significa que o funcionamento do experimento está a desenvolverse nunha dirección máis sinxela e amigable.

Foregene pretende axudar a máis investigadores científicos a aforrar tempo e custos experimentais, obter resultados experimentais de alta calidade e crear conxuntamente logros de investigación científica máis valiosos.