Lnc-RT Heroᵀᴹ I (Con gDNase) (Super Premix para a síntese de cDNA da primeira cadea a partir de lncRNA)
Especificacións
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (con gDNase) é un sistema de transcrición inversa desenvolvido especialmente para que o lncRNA elimine rapidamente a contaminación do ADN xenómico.A mestura 5×gDNase pode eliminar rapidamente o xenoma restante do ARN a 42 °C durante 2 minutos, evitando efectivamente a interferencia do xenoma nos resultados da qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix contén Foregene LncRNA Reverse Transcriptase especialmente desenvolvido por Foregene, que é un novo tipo de transcritase inversa especificamente para lncRNA e outros modelos de complexos de ARN longos, cunha afinidade de ARN máis forte e unha maior eficiencia de gravación inversa.O sistema optimizado fai que a taxa de transcrición inversa sexa máis rápida e pode transcribir facilmente modelos de ARN con alto contido de GC e estrutura secundaria complexa.A síntese de ADNc da primeira cadea pódese completar a 42 °C en 15 minutos.
Compoñentes do kit
| 5× Mestura de gDNase |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| DdH2O libre de RNase |
| Instrucións |
Características e vantaxes
■Capacidade eficiente para eliminar gDNA, que pode eliminar gDNA do modelo en 2 minutos.
■ Pode revertir a transcrición do lncRNA de forma eficiente.Cando o produto de transcrición inversa se somete a qPCR, o valor de Ct é inferior ao do sistema de transcrición inversa convencional.
■ Sistema de transcrición inversa eficiente, só leva 15 minutos completar a síntese da primeira cadea de ADNc.
■ Modelos complexos: os modelos con alto contido de GC e estrutura secundaria complexa tamén se poden reverter con alta eficiencia.
■ Sistema de transcrición inversa de alta sensibilidade, os modelos de nivel pg tamén poden obter ADNc de alta calidade.
■ O sistema de transcrición inversa ten unha alta estabilidade térmica, a temperatura de reacción óptima é 42℃, e aínda ten un bo rendemento de transcrición inversa en 50℃.
Aplicación do kit
Análise cuantitativa relativa do lncRNA.
Análise cuantitativa absoluta de lncRNA.
Pode analizar con rapidez e precisión ARN traza como o virus de ARN.
Transcrición inversa de modelos de ARN con alto contido en GC ou estrutura secundaria complexa.
Fluxo de traballo
Almacenamento e vida útil
O kit debe almacenarse a -20°C. Gardar o produto nunha neveira a temperatura constante a -20°C inmediatamente despois da recepción.Se as condicións de almacenamento son adecuadas, o produto non degradará ningún rendemento durante o período de validez dun ano.
Guía de análise de problemas
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplificación específica
1. Deseño de imprimación non razoable
Recomendación: Deseñar imprimacións segundo os principios de deseño de imprimacións.
2. Residuos do xenoma.
Suxestión: asegúrate de que o primeiro paso da temperatura de reacción de eliminación do ADNg sexa de 42 °C e que o tempo de reacción tamén se poida ampliar ata 5 min.
Sen sinal de amplificación por RT-qPCR
1. O ARN degrádase.
Recomendación: o material para a extracción de ARN debe ser o máis fresco posible e debe utilizarse ARN de alta calidade e pureza.
2. O ARN contén inhibidores.
Recomendación: os inhibidores da transcrición inversa inclúen xeralmente SDS, sales de guanidina, EDTA, etc. Recoméndase lavar o precipitado de ARN con etanol ao 70 % para eliminar os inhibidores.
3. Problemas de deseño de cartografía.
Recomendación: segundo o principio de deseño de imprimacións, redeseñe as imprimacións para a súa inspección.
A banda de destino aparece no control en branco
1. Contaminación de útiles operativos ou reactivos.
Recomendación: Todos os reactivos ou equipos para o experimento deben ser esterilizados en autoclave.Teña coidado e coidado ao manipular para evitar que as mostras de ADN sexan succionadas pola pipeta ou se derramen fóra do tubo da centrífuga.
2. A contaminación produciuse durante a preparación do sistema de reacción PCR.
Recomendación: Tomar as precaucións necesarias na manipulación, tales como: usar luvas de látex, usar puntas de filtro.Use Real Time PCR Mix nun sistema a proba de contaminación.
3. Os cebadores están degradados.
Suxestión: use a electroforese SDS-PAGE para detectar se os cebadores están degradados e substitúao por novos cebadores para experimentos de detección de fluorescencia.
Manual de instrucións:
