Protocolo do kit de PCR directa de tecido animal (sen ferramentas de mostraxe).
Descrición do kit:
Use directamente lisado de tecido animal como modelo para a amplificación por PCR, sen extracción separada de ADN, rápida e de alta sensibilidade.
◮Non é necesaria unha purificación de ADN custosa e lenta.
◮A demanda de mostra é pequena, só tome unha soa semente.
◮Non son necesarios tratamentos especiais como moenda e trituración, e a operación é sinxela.
◮O sistema de PCR optimizado permite que a PCR teña unha maior especificidade e unha maior tolerancia aos inhibidores da reacción da PCR.
Descricións
Este kit usa un sistema único de tampón de lise para liberar rapidamente ADN xenómico de mostras de tecido animal para reaccións de PCR, polo que é especialmente axeitado para probas xenéticas a gran escala.
O proceso de liberación do ADN xenómico do tampón de lise complétase en 10-30 minutos a 65 °C.Non son necesarios outros procesos como a eliminación de proteínas e ARN, e o trazo de ADN liberado pode usarse como molde para a reacción de PCR.
2 × PCR EasyTMA mestura ten unha forte tolerancia aos inhibidores da reacción de PCR e pode usar o lisado da mostra que se vai probar como molde para unha amplificación eficaz e específica.Este reactivo contén Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, tampón de reacción, optimizador e estabilizador de PCR.
A ADN polimerase D-Taq é unha ADN polimerase desenvolvida especialmente por Foregene para reaccións directas de PCR.A ADN polimerase D-Taq ten unha forte tolerancia a unha variedade de inhibidores da reacción de PCR, e pode amplificar de forma eficiente cantidades traza de ADN en varios sistemas de reacción complexos, e a velocidade de amplificación pode alcanzar os 2 Kb/min, o que é especialmente axeitado para a reacción de PCR directa.
Especificacións
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Compoñentes do kit
| Parte I | Tampón AL |
| Protease de xenes anteriores | |
| 6× Tampón de carga de ADN | |
| Parte II | 2 × PCR EasyTMMesturar |
Características e vantaxes
■Non hai unha purificación de ADN cara e lenta
■ A demanda de mostra é pequena, só se poden probar 5 mg de tecido animal.
■ Non é necesario ningún tratamento especial como moenda e trituración, e a operación é sinxela.
■ O sistema de PCR optimizado fai que a PCR teña unha maior especificidade e unha maior tolerancia aos inhibidores da reacción da PCR.
Parámetros do kit
Aplicación: unha variedade de tecidos animais.
ADN liberado da lise da mostra: só se usa como molde de PCR.
O kit pódese utilizar para os seguintes fins: identificación de transxenose, xenotipado animal, etc.
Fluxo de traballo
Almacenamento e vida útil
A parte I deste kit debe almacenarse entre 2 e 8℃.
O reactivo Buffer AL pódese almacenar durante 12 meses en condicións secas;pódese almacenar entre 2 e 8℃para un almacenamento máis longo.
O reactivo Foregene Protease ten unha fórmula única.Para garantir a súa actividade e estabilidade, gárdao no 4℃durante 12 meses.
Reactivo 6×O tampón de carga de ADN pódese almacenar en 4℃ou -20℃por moito tempo.
A parte II deste kit debe almacenarse a -20℃.
Reactivo 2×PCR fácilTMA mestura pódese almacenar durante 12 meses a -20℃;se se usa con frecuencia, tamén se pode almacenar en 4℃para almacenamento a curto prazo (usar dentro de 10 días).
